Cassification
技術(shù)文章/ Technical Articles
影響抗原抗體反應(yīng)的兩個(gè)因素:1、反應(yīng)物自身的因素抗體:不同來(lái)源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗(yàn)的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價(jià)帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.2、反應(yīng)環(huán)境條件酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行...
在培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中,難免培養(yǎng)的細(xì)胞被污染了,得不到想要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,那么你知道細(xì)胞培養(yǎng)的污染來(lái)源有哪些嗎?細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中污染的來(lái)源主要有以下幾條途徑:一、不潔的動(dòng)物組織標(biāo)本很多動(dòng)物組織本該是無(wú)菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外),但由于取材時(shí)不小心也會(huì)有污染的機(jī)會(huì)。組織本身含有細(xì)菌,如取材時(shí)不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡,也會(huì)帶菌,造成細(xì)胞污染。二、空氣空氣中含有大量的微生物,如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分下,很容易造成污染。另外,凈化工作臺(tái)使用過(guò)久,濾板未定...
抗體保存溫度和條件抗體的保存方法一般會(huì)直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當(dāng)?shù)那闆r下,大部分抗體可以存放數(shù)月甚至數(shù)年,一般情況需嚴(yán)格按照抗體說(shuō)明書(shū)來(lái)進(jìn)行保存??贵w保存溫度和條件:1、抗體收到后,需在12000rpm離心1~5分鐘,再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存,如果抗體體積不足50ul,可延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘,從而確??贵w全部離心下來(lái)。2、對(duì)于多數(shù)抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是zuijia選擇。腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存,因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期...
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(captureAb)固定在固相載體上,再加入一級(jí)檢測(cè)抗體(primarydetectionAb),形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標(biāo)記了,即可用來(lái)直接測(cè)定抗原的量,若無(wú),則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。測(cè)定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate),作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系,依此原理計(jì)算出樣本中的抗原總量...
佰利萊生物為您講解PCR反應(yīng)效率低值解析反應(yīng)效率視為實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析設(shè)計(jì)和優(yōu)化的關(guān)鍵因素。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(通過(guò)對(duì)目標(biāo)模板進(jìn)行連續(xù)梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應(yīng)的“健康”標(biāo)志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩種情形的步驟則相差甚遠(yuǎn)。理想的反應(yīng)效率為100%,但反應(yīng)效率在90–110%范圍內(nèi)都是可以接受的。確定某個(gè)特定的分析效率是否低下的方法是稀釋模板生成標(biāo)準(zhǔn)曲線(模板稀釋的范圍應(yīng)涵蓋所有未知樣本),然后查看該范圍內(nèi)的效率。它應(yīng)盡可能接近100%...
ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)溫育解讀在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加酶結(jié)合物和顯色劑后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育。溫育的時(shí)間選擇:溫育這一步是ELISA測(cè)定中最容易出現(xiàn)問(wèn)題的步驟。目前國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃30分鐘-1小時(shí),進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時(shí)才能有較wan全的結(jié)合,低于1小時(shí),可能會(huì)影響測(cè)定下限。ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表...
ELISA試劑盒結(jié)果判定:1、結(jié)果的判定嚴(yán)格依據(jù)試劑盒提供的陽(yáng)性判定值(CO)進(jìn)行結(jié)果判定。廠商提供試劑的同時(shí),說(shuō)明書(shū)上列出的CO值是建立在一系列科學(xué)試驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)研究的基礎(chǔ)上,不應(yīng)隨意更改。定量測(cè)定需要制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算結(jié)果。2、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下ELISA結(jié)果報(bào)告方式為“陰性"或“陽(yáng)性",在二者之間有一條明確的分界線,也就是所謂的陽(yáng)性判定值即CO值,對(duì)于樣本的吸光度值(A)高于CO值就判斷為陽(yáng)性,相反則判斷為陰性,然而在實(shí)際工作中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)樣本A值位于CO值附近...
細(xì)胞是生命的基本單位。(除了病毒外。)細(xì)胞由細(xì)胞核組成和細(xì)胞膜還有線粒體等組成。(除個(gè)別生物)小到細(xì)菌大至鯨魚(yú)。都由細(xì)胞組成。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧總括:1.買(mǎi)細(xì)胞要去正規(guī)的地方購(gòu)買(mǎi),一般產(chǎn)品資料上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的詳細(xì)介紹,這樣在培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。2.不管是買(mǎi)的細(xì)胞,還是他人惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手需要趕緊做的兩件事:一檢測(cè)是否有支原體污染;二迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。3.發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)養(yǎng)了很多種細(xì)胞...
化學(xué)滅菌法系指利用化學(xué)藥品的氣體或產(chǎn)生的蒸汽進(jìn)行殺滅微生物的方法。同一種化學(xué)藥品的低濃度時(shí)呈現(xiàn)抑菌作用,而在高濃度時(shí)則能起殺菌作用。其殺菌機(jī)理可能是:能使微生物蛋白質(zhì)變性死亡,或與酶系統(tǒng)結(jié)合影響代謝,或改變膜壁通透性使微生物死亡等?;瘜W(xué)氣體滅菌法可分為三種:臭氧消毒法、甲醛等蒸汽熏蒸法、環(huán)氧乙烷滅菌法。下面詳解三種化學(xué)氣體滅菌法:1.臭氧消毒法臭氧(O3)的消毒原理是:臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,很快自行分解成氧(O2)和單個(gè)氧原子(O),后者具有很強(qiáng)的活性,對(duì)細(xì)菌有強(qiáng)...
抗體是什么:抗體是哺乳動(dòng)物適應(yīng)性免疫系統(tǒng)對(duì)抗病原體的核心,它是在病原體刺激下由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)所分泌的一種免疫球蛋白,能夠識(shí)別并結(jié)合特異的病原體抗原,隨后通過(guò)介導(dǎo)中和作用、調(diào)理作用、效應(yīng)T細(xì)胞殺傷等來(lái)清除病原體。隨著抗體制備與改造技術(shù)的飛速發(fā)展,抗體已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,包括科學(xué)研究、診斷、治療等??贵w的制備歷史和工藝決定了抗體的質(zhì)量和類型??贵w制備工藝可分為三個(gè)階段:傳統(tǒng)方法免疫動(dòng)物獲得抗體、應(yīng)用雜交瘤技術(shù)制備抗體和基因工程技術(shù)制備抗體。具體如下:1、傳統(tǒng)方法...
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